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    勁馬生物|elisa實驗結果分析

    發布時間: 2022-04-25  點擊次數: 93次

    酶聯免疫吸附測定enzyme linked immunosorbent assay(簡寫ELISA)指將可溶性的抗原或抗體結合到聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體結合專一性進行免疫反應的定性和定量檢測方法。ELISA操作步驟復雜,影響反應因素較多,實驗過程中每一步操作都可以影響實驗結果,一不留心會出現“花板"現象,這種情況很慘,樣品需要全部重新分析。引起這種情況 或部分樣品重新分析的可能原因有以下因素:


    1,所有實驗過程中使用一次性加樣槍頭,不可為省耗材實驗過程中交叉使用。


    2,實驗所用試劑保證沒有長菌,pH 調到合適。


    3,操作過程中防止手套上其他液體污染樣品或試劑。


    4,洗板時不可使用別人使用或的槍頭,或洗板機的廢液瓶沒有及時倒掉,引起全板污染。


    5,加顯色液或終止液時孔中有氣泡,會引起樣品復孔間的變異系數差異很大。


    以藥代動力學實驗為例


    1,整塊板所有樣品全部重新復測,也分兩種情況:

    ①標準曲線不滿足接收標準


    ②標準曲線滿足標準,到質控樣品不滿足接收。


    2,部分樣品或單個樣品需要重新分析,在標準曲線和質控樣品都滿足接收標準時,部分樣品或某個樣品復孔間CV值不滿足接收標準,或者樣品的濃度超出或低于標準曲線,都要進行重新分析。


    elisa試劑的臨界值,cutoff值是被檢分析物的量值,高于此值可判定為陽性,低于則為陰性,大多數免疫分析,來自感染和非感染人群的樣本之間有一個檢測結果的重疊區,這就說明一個實驗一般不大可能有完全的(100%)敏感性、特異性或預測值。在選擇cut-off值和報告檢測結果時應該考慮敏感性、特異性或預測值哪個更重要。至于cutoff值的計算,不同檢測方法計算方式不同。


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